Priča o sliciŠta se krije iza slike
Na slici vidimo svetu Anu, njenu kćerku Djevicu Mariju i malog Isusa. Likovi su raspoređeni u dinamičan oblik piramide, što je postalo obilježje visoke renesanse. Međutim, sam položaj odrasle Marije koja sjedi u krilu svoje majke vrlo je neobičan, a historičari i danas raspravljaju o njegovom tačnom značenju.
Mali Isus je prikazan u igri s janjetom, koje simbolizuje nevinost i njegovu buduću žrtvu za čovječanstvo. Djevica Marija pruža ruke prema njemu i pokušava ga zadržati. Leonardo je na ovaj način majstorski izrazio prirodni majčinski instinkt da zaštiti svoje dijete od njegove teške božanske sudbine.
Leonardo je na ovom djelu radio s prekidima gotovo dvadeset godina i nikada ga nije predao naručiocu. Sliku je zadržao kod sebe sve do svoje smrti u Francuskoj 1519. godine. Zanimljivo je da je poznati psiholog Sigmund Freud u prikazu dvije majke vidio odraz Leonardovog djetinjstva, s obzirom na to da su umjetnika odgajale i biološka majka i maćeha.